斑马鱼miR-196a-1基因敲除品系的构建

microRNA(miRNA)是一类内生的、长度约为19～23个核苷酸的非编码RNA,通过影响mRNA的稳定性和翻译,来参与基因表达的转录后调控。生物信息学分析表明该基因在各个物种中高度保守。为了阐明该基因在肠道发育中的作用,本文利用Cloning free CRISPR/Cas9基因编辑技术构建miR-196a-1基因敲除的斑马鱼品系。首先通过分析软件筛选出斑马鱼miR-196a-1基因的两个敲除位点,两个敲除位点相隔132 bp,利用PCR技术扩增miR-196a-1的向导DNA,再以向导DNA为模板转录得到miR-196a-1的sgRNA,将miR-196a-1基因的sgRNA和Cas9蛋白共同注射到斑马鱼胚胎1细胞期胚胎中。斑马鱼胚胎发育到36 hpf后进行基因编辑的有效性检测,研究结果显示,miR-196a-1基因出现102 bp碱基的缺失,表明CRISPR/Cas9系统对miR-196a-1基因的敲除有效。对其F0代、F1代、F2代进行筛选,成功获得斑马鱼miR-196a-1基因敲除品系,为研究miR-196a-1在肠道发育中的作用奠定了基础。     

稗草生防菌株NX1的生物学特性及致病性研究

【目的】稗草是我国农田危害最严重的恶性杂草之一，化学除草剂的长期使用导致杂草抗药性上升、环境污染等诸多生态环境问题，因此开发绿色、环境友好的高效除草剂显得十分必要且迫切。【方法】采用常规组织分离法、形态学观察和分子生物学方法鉴定NX1菌株，并采用多元统计分析方法研究NX1菌株的致病性及其影响因素。【结果】经鉴定NX1菌株可能为弯孢属新种(Curvularia sp.)。该病原菌在25−30 、pH为5−11的条件下均能生长和产孢，其中，在pH为9、30 条件下产孢量最高。光照条件虽然不影响菌丝的生长，但连续光照条件有利于NX1菌株产孢。NX1菌株在不同碳源、氮源条件下都能生长，其中对玉米粉和硝酸钠的利用效果最好。室内生防试验表明，湿度、稗草叶龄、光照时间及孢子浓度均是显著影响NX1菌株致病性的因素，其中湿度是最关键的因素。作物安全性试验表明，该菌株的分生孢子液对水稻、油菜、辣椒和茄安全。【结论】综上所述，菌株NX1对环境和营养条件要求不高，适合工业化生产及田间应用，具有开发成为生物除草剂的潜力。     

闪蓝红点唇瓢虫对考氏白盾蚧的捕食作用研究

闪蓝红点唇瓢虫是猕猴桃考氏白盾蚧的主要天敌,在湖南一年发生1代,以幼虫在猕猴桃树干及枝条上的考氏白盾蚧下或以蛹在立架铁丝和猕猴桃小枝上越冬,该瓢虫成虫对考氏白盾蚧卵的功能反应属于Hassell &Comins Ⅲ型,对雌成蚧和雄蛹的功能反应属于Holling Ⅱ型;取食卵的“S”型曲线方程为Na=0.06339N/1+0.06339N+7.16307×10~(-5)·N~2,取食雌成蚧和雄蛹的圆盘方程分别为Na=1.0211N/1+0.008443N和Na=0.7315N/1+0.002394N;一昼夜对卵、雌成蚧、雄蛹的最大捕获量分别为885粒、121头和308头。     

喀斯特区不同退化程度植被群落植物-凋落物-土壤-微生物生态化学计量特征

为摸清喀斯特植被退化对群落各组分C、N、P生态化学计量特征及内稳态特征的影响，为喀斯特退化生态系统植被恢复与重建提供科学依据，以桂西北喀斯特地区5种退化程度植被群落为研究对象，测定了不同退化程度植被群落植物叶片、凋落物、土壤和微生物生物量的C、N、P含量，分析其化学计量比特征、相互关系及植物内稳性特征。结果表明：(1)随着退化程度加剧，叶片C、N、P含量、N∶P和凋落物N∶P、微生物量C显著下降，而叶片C∶N、C∶P则显著增加，且植物叶片N∶P<14;随退化程度加剧，凋落物N、P含量、土壤C、N、P含量、微生物量N、P呈先略有增后显著降低的趋势，且不同退化程度群落土壤N∶P和微生物量C∶N无显著差异。(2)叶片N、P含量与土壤N、P含量，叶片C∶P与土壤C∶N、C∶P、N∶P,叶片N∶P与凋落物N、N∶P,叶片C、N、P含量与微生物量C呈显著或极显著正相关关系；叶片C∶N与土壤C、N,叶片C∶P与土壤N、P,叶片N∶P与土壤P呈显著或极显著负相关关系。(3)喀斯特地区植物叶片N、P元素的内稳性指数(H)平均值分别为2.74和2.31,属于弱稳态型，叶片N∶P的H值为5.14,为稳...     

灌溉方式对稻田土壤微生物群落功能多样性的影响

为了探讨3种不同灌溉模式对土壤微生物群落功能多样性的影响。本研究采用Biolog-ECO板研究了双季稻田连续五年不同灌溉处理(长期灌溉,湿润灌溉,间歇灌溉)下的土壤微生物群落功能多样性。结果表明,不同灌溉方式处理的土壤微生物代谢活性强度为间歇灌溉湿润灌溉长期淹水灌溉。在不同的处理中,α-环式糊精和D-葡萄胺酸解释了主要的差异。氨基酸和糖类碳源是间歇灌溉和湿润灌溉灌溉模式下主要被利用的碳源,而酯类在长期淹水灌溉模式被利用的最多。通过评价3种灌溉方式下稻田土壤的代谢特征,证实了间歇灌溉方式有利于提高稻田土壤微生物的功能多样性,为稻田水分科学管理提供了理论依据。     

不同浓度Ca~(2 )和NH~(4 )下草莓试管苗的分化

试验材料为引种筛选后的日本草莓(Fragaria xananassa)品种“宝交早”,外植体为匍匐茎尖生长点(0.2mm)与分割后的试管丛生芽小块。MS培养基中的NH_4NO_3以(NH_4)_2SO_4代替,以不同Ca~(2 )和NE_4浓度配比培养基与MS对照,各培养基均附加BA0.25mg/L。每瓶培养基接一个茎尖生长点,经不断继代培养,统计每瓶的苗数,比较各处理间一次继代培养的苗分化效果。培养温度25±1℃,每天光照12小时,光照度1500～2000 lx。统计分析用小样本t测。获得结果如下:     

应用柯尔莫哥洛夫检验研究（0—1）变量与连续变量间的相关性

本文介绍了柯尔莫哥洛夫检验的基本思想,探讨了用柯尔英哥洛夫检验研究(0,1)变量与连续性变量相关的办法,并举例作了说明。     

复合微生物菌剂在长毛对虾标苗养殖过程中的应用研究

复合微生物菌剂是一类有效的生物防治剂,在农业和水产养殖业中都起着重要的作用。本研究以长毛对虾(Penaeus penicillatus)标苗为试验对象,共分为4个组别,组1投喂无微生物菌剂添加的饲料作为对照组,组2、组3和组4为试验组,投喂有复合微生物菌剂添加的饲料,其中微生物菌剂分别占饲料质量的1. 0%、1. 5%和2. 0%。每个组进行33 d的养殖,测定养殖期间对虾生长性能、养殖水池底泥和水质相关性质,探讨微生物菌剂对对虾生长的影响。结果显示:试验前对照组与3个试验组的体重无显著差异(P 0. 050),试验后各试验组的体重均高于对照组(P 0. 050),其中组4体重达(0. 60±0. 03) g,表明微生物菌剂的使用促进了对虾标苗的生长;水体弧菌个数在试验不同时间之间有显著差异(P=0. 000),对照组呈上升趋势,第30天时未添加微生物菌剂的对照组弧菌数目最高,表明微生物菌剂能控制水体有害菌的生长;水体中的溶解氧(DO)含量在养殖不同时间之间均具有显著差异(F=191. 959,P=0. 000),NH4-N、NO2-N和NO3-N的含量均是如此,F值分别为250. 633、659. 806和1 937. 649,P值均为0. 000,从养殖第10天开始,试验组DO含量均高于对照组,而试验组的NH4-N、NO2-N和NO3-N含量均低于对照组。综上所述,复合微生物菌剂对对虾有明显地促生长作用,并且还能在一定程度上净化养殖环境。